Plus All-in-one 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix

产品名称：Plus All-in-one 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix (gDNA Purge)
中文名称：一体式第一链cDNA合成超级预混液（去除gDNA）

产品编号与包装规格：

产品描述：第一链cDNA合成预混液是以mRNA或者总RNA为模板，高效 合成第一链cDNA。本产品含有反转录反应所需的全部试剂 （II Reverse Transcriptase，RNase Inhibitor，Oligo(dT)18，Random N6，dNTPs）。反应时只需要加入RNA模板和水即可，操作简单，降 低操作过程中的污染。本制品含有去基因组成分gDNA Purge，以 RNA为模板进行cDNA第一链合成时，可以同步去除基因组DNA污 染，反应结束后，75℃加热5分钟，就可以失活反转录酶，RNA酶 抑制剂。合成的第一链cDNA能直接用于PCR 或荧光定量PCR的模 板，第二链cDNA的合成或线性RNA扩增，也可用于需要用带有 放射性或非放射性核苷酸标记第一链cDNA的实验。

产品特点：
      本制品采用耐高温逆转录酶，大幅提高热稳定性和 cDNA 合 成效率； 
      本制品中添加的II Reverse Transcriptase 无 RNase H 活性，可 避免第一链 cDNA 合成过程中，RNA/DNA 杂交模板链中 RNA 降解，保证 cDNA 合成的质量；
      本制品中 Random N6 和 Oligo(dT)18 引物比例经过优化，可均 匀合成样品中的 cDNA；
      本制品中含有去基因组成分，反转录时可同步去除基因组 DNA 污染。

保存温度：-20℃。

产品包装：

注意事项：
      1）用DEPC 处理实验用到的所有实验器材，或者 购买已经证明无核酸酶的实验用具，实验过程戴 手套并经常更换手套，避免 RNA 酶的污染。 
      2）确保所用试剂中无 RNA 酶污染。 
      3） 试剂盒要严格密封保存。在反转录过程中，所 有管子要确保扣严。 
      4） 纯化过的RNA 必须保证不含有盐，金属离子， 乙醇和本酚，以上成分会干扰第一链 cDNA 的合 成反应。可采用乙醇沉淀RNA 的方法去除掉痕量 污染物。 
      5） 为保证反转录反应的有效进行，需使用高质量 的RNA 模板。 
      6） 实验结果显示，最快逆转录速度可达2kb/min， 需要提高反转录效率或模板含量较低时可以适当 延长反转录时间。

操作方法与常用PCR 循环：

注意：当 RNA 浓度较高或目标基因属高拷贝基因时，可将去基因组 和逆转录合为一步操作，更省时省力。所有组分加到一起，50℃孵 育15-30min，最后75℃孵育5min 终止反应即可。

客户应用实例与本试剂盒在 37℃条件下保存的稳定性验证：